蛋白脱盐离心柱是一种的改良葡聚糖脱盐装置，其⼯作原理主要是利⽤具有⽹状结构的葡聚糖凝胶的分⼦筛作⽤，根据被分离物质的分⼦⼤⼩不同来进⾏分离。蛋白脱盐柱对盐和⼩分⼦的滞留率在95%以上，⼏乎等体积回收，样品不会被稀释，可以在 出⾊地完成蛋⽩质脱盐的同时保持极⾼的回收率。 此产品⽆需装柱，代替⽐较耗时的传统透析处理，以达到快速纯化蛋⽩质/替换蛋⽩质缓冲液的⽬的。只需 简单的⼏次离⼼，即可完成从100μL至 3mL 的样品提供无故障脱盐和缓冲液交换。

»高回收率—低结合树脂极大提高了蛋白回收率

»快速—无需筛选或等待依赖重力流出的蛋白

»经济—比其他市售预装柱更经济实用

»稳定—可重复使用

操作步骤

1.平衡脱盐柱

a. 将离⼼脱盐柱下⽅堵头去除，先向⼀个⽅向轻微扭转，再向另⼀个⽅向扭转，然后放回收集管中，1000×g离⼼ 1分钟，倒掉收集管中保护液。

b.将离⼼柱重新放回收集管中，向离⼼柱中加⼊250μl平衡液（样品脱盐后想要置换的缓冲液），静置待平衡液全部渗⼊填料后，1000×g离⼼1分钟，重复三次，去除收集液。

2.样品处理

将离⼼柱放⼊⼲净的EP管中，加⼊100μl~200μl样品，静置3min，1000×g离⼼1分钟，EP管中溶液即为脱盐后的样品。

3.脱盐柱的再⽣和保存

将使⽤过的脱盐柱，加⼊300μl 0.5M NaOH溶液，静置2min，1000×g离⼼1min，重复两次。然后加⼊300μl去离⼦ ⽔，静置 2min，1000×g 离⼼1min，重复三次。将处理好的脱盐柱，加⼊20%⼄醇溶液，下端放上红⾊堵头，拧紧盖⼦ 2~30℃保存即可。 

推荐最大上样量：  

注意事项

1.样品处理量要在柱子处理范围内，过多会导致脱盐不完全，过少会导致样品回收率下降；

2.填料在高浓度醇溶液或饱和盐溶液中会有失水收缩现象，请勿将上述溶液进行过柱；

3.加样时尽量均匀加至管中心位置；

4.当样品浓度过低时，需先将样品浓缩到所需体积或所需浓度。

常见问题

1.蛋白回收率偏低

分析：a、蛋白浓度过低（<0.01mg/ml)

b、所置换的缓冲液成分或PH非最适缓冲液，产生了非特异性吸附

处理：a、现对蛋白液进行适当浓缩后脱盐

b、更换适合的缓冲液，并充分平衡预装柱2-3次

2.蛋白回收后出现浑浊或沉淀

分析：a、缓冲液非最适缓冲液

b、缓冲液中的某些离子被除去了，导致蛋白质等电点聚沉

处理：更换适合的缓冲液，并充分平衡预装柱2-3次

3.脱盐不干净

分析：盐离子浓度过高（>0.5M）

处理：根据盐离子浓度适当增加脱盐次数或稀释后脱盐